慢性HBV感染免疫治疗研究进展

北京大学第一医院     王贵强

     慢性HBV感染是严重危害人类健康的疾病。目前国内外对HBV感染公认的疗法是抗病毒治疗。但随着对病毒性肝炎发病机制的深入研究,人们也在尝试用各种免疫的方法治疗慢性HBV感染。

    以疫苗为基础的免疫治疗

     治疗性疫苗是通过某种途径来弥补或激发机体的免疫反应,达到清除病毒的目的。核酸疫苗又称DNA疫苗,它不仅可诱导体液免疫应答,而且能诱导强烈的细胞免疫应答,有望用于病毒性肝炎的治疗。Jung M-C等应用前S1、前S2和S抗原组分疫苗,能够引发慢性HBV携带者针对HBsAg的CD4+T淋巴细胞应答,但未能介导Thl细胞因子分泌和病毒特异性CD8+T淋巴细胞应答。Gray研究小组采用HBV核心区细胞毒性T淋巴细胞(CTL)结合表位第18-27氨基酸、破伤风毒素以及棕榈酸分子制备成治疗性疫苗,I期临床试验结果显示该疫苗安全,并能活化抗原特异性CTL,其水平与急性自限性肝炎的CTL相当。但对慢性肝炎病人的研究发现,该疫苗只激发低水平的CTL应答,不能有效清除病毒或降低HBV DNA水平。进一步研究发现,慢性病毒性肝炎病人的T辅助性细胞反应低下,不能产生大量的细胞因子以及对破伤风毒素的免疫应答,是疫苗反应低下的原因。

    以细胞因子为基础的免疫治疗

     在机体抗病毒的免疫反应中有多种细胞因子参与,其中,粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IFN-α及IL-2在感染性疾病治疗中的辅助作用,受到越来越多的重视。在病毒特异性CTL的过继性回输中,研究者发现IL-2对效应T细胞的存在和增殖起关键作用。近年来,随着IFN-α重组高纯度细胞因子的研制成功,使其在临床上治疗乙型肝炎、生殖器疱疹等疾病中取得了良好效果。另外,随着对病毒性疾病的细胞生物治疗的开展,细胞因子作为细胞过继治疗中不可缺少的重要的辅助因子发挥着重要的作用,如在树突细胞(DC)的过继治疗中IL-12的刺激不仅影响DC的表型和功能,而且还对DC活化特异性T细胞作用有一定的影响。在DC的过继免疫中,有学者通过IL-12因子刺激或用构建好的缺陷型Ad-IL-12载体转染DC,使DC表达IL-12的基因来进一步改善DC的功能或活化。

    以免疫效应细胞为基础的免疫治疗

     在机体抗病毒感染的特异性免疫反应中,细胞免疫起重要作用。有研究证明,在病毒慢性感染者的机体内,特异性T细胞的杀伤活性非常弱,甚至处于“无能”状态,产生“耐受性”。回输具有病毒特异性的CTL能清除体内病毒。人们普遍认为病毒清除是CTL在组织相容性复合物(MHC)类分子限制下,通过对病毒感染细胞的细胞毒作用实现的。但在HBV转基因小鼠模型中发现,CTL在清除病毒过程中,通过分泌TNF-α和TNF-β下调HBV mRNA的水平,抑制HBV复制,却不引起肝细胞的损伤。Vitello等用一种含脂质体、T辅助细胞和CTL识别位点的HBV疫苗免疫动物和人,可明显增强CTL位点抗原性作用,增强特异性CTL的产生,治疗HBV的感染。在一些动物模型中(如HBV感染鼠)已证明回输有病毒特异性的CTL能彻底清除动物体内病毒。

    以抗原递呈细胞为基础的免疫治疗

     慢性病毒性感染的机体都存在不同程度的免疫功能低下,患者的抗原递呈细胞(APC)往往不能正确地处理和递呈抗原信号。我们的研究发现,在慢性HBV感染的病人中,DC的表型及功能均与正常人有差异,表现为参与刺激信号传导的表面分子表达下降,混合淋巴细胞培养中促淋巴细胞增殖能力下降,其究竟是病毒感染所致的结果,还是导致病毒持续感染的原因至今仍不清楚。但是采用病毒抗原多肽在体外刺激DC,可大大提高对病毒抗原的递呈,激发特异性CTL的免疫应答反应。另外,一些佐剂的使用如poly I∶C、CpG等也可在体外大大改善DC的表型和功能。这些通过体外刺激恢复并改善DC功能的研究,为基于抗原递呈细胞的临床免疫治疗奠定了基础。国内已经有学者应用抗原负载的DC疫苗治疗慢性乙型肝炎取得一定效果。但应用DC介导的免疫治疗前,有诸多问题应该深入细致研究,如:感染者DC状态功能低下究竟是感染的原因还是结果?哪种抗原或多肽是最佳刺激抗原?其剂量和作用时间如何?输注到体内的DC能否有效发挥预期的作用?

    其他免疫相关的治疗

     有研究者给42例慢性乙型肝炎患者口服含有HBsAg+preSl+preS2的疫苗,3次/周,用20~30周。结果28例患者(66.6%)出现应答,15例(35.7%)病毒载量明显下降,12例(30%)组织学改善明显,26.3%出现HBeAg阴转,并且发现T细胞应答反应。新近日本学者报告,联合拉米夫定和乙肝疫苗治疗72例慢性乙型肝炎患者,取得一定效果。72例患者应用拉米夫定12个月,其中15例(9例HBeAg阳性、6例HBeAg阴性)接受20μg乙肝疫苗皮下注射每2周1次,共12次。结果联合组9例HBeAg阳性者治疗结束时HBV DNA均阴转(100%),而单用拉米夫定组31例HBeAg阳性者只有15例(48%)阴转(P<0.05);血清转换发生率联合组为56%,单用拉米夫定组为16%(P<0.05)。57例单用拉米夫定患者停药后10例HBV DNA阳转,且4例出现肝炎发作,而联合组未发现此现象。研究结果提示,联合疫苗和拉米夫定治疗可望提高持久应答和血清转换率。